His-tag是由6個C?H?N?O?組成的短肽，分子量很小，不會遮蓋融合蛋白中其他蛋白的表位和結(jié)構(gòu)域，也不會影響蛋白的結(jié)構(gòu)和功能。帶有His標(biāo)簽的蛋白，與瓊脂糖凝膠或磁珠上的螯合金屬離子Ni2+形成配位鍵特異性的結(jié)合，而被純化。金斯瑞提供His標(biāo)簽蛋白分離純化的鎳填料、鎳磁珠和鎳填料預(yù)裝柱等，用于His標(biāo)簽蛋白的分離純化。

Ni2+離子的螯合劑有：三配位的亞氨基二乙酸（IDA）、四配位的氮川三乙酸（NTA）和五配位的三（羧甲基）乙二胺（TED）。蛋白質(zhì)的吸附量的排列順序為：IDA>NTA>TED；還原劑的耐受力的排列順序為：TED>NTA>IDA。

螯合金屬Ni2+離子的螯合劑是偶聯(lián)在瓊脂糖凝膠介質(zhì)上的，一般4%的瓊脂糖凝膠基質(zhì)適用于手動或蠕動泵的重力柱純化，金斯瑞提供的填料有Ni-IDA親和層析介質(zhì)（L00223I）、Ni-NTA純化介質(zhì)（ L00250）。一般6%的瓊脂糖凝膠基質(zhì)可耐受0.3MPa壓力，適用于AKTA等純化設(shè)備，金斯瑞提供的填料有：Ni-IDA Resin FF（L00465）、 Ni-NTA填料High Affinity Ni-Charged Resin FF（L00666）、Ni-TED填料High Affinity Ni-TED Resin FF（L00885），預(yù)裝柱有：Ni-IDA Resin FF預(yù)裝柱（L00684）和Ni-NTA預(yù)裝柱High Affinity Ni-Charged Resin FF Prepacked Column（L00683）。

His標(biāo)簽蛋白純化填料及磁珠選擇指南